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测试氨基酸的分析方法
发布时间:2014-11-17
氨基酸是蛋白质的基本结构单位和生物代谢过程中的重要物质,氨基酸分析技术对蛋白质、生物和整个生命科学研究以及产品开发、质量控制和生产管理等具有重要意义,广泛地应用于化工、轻工、食品加工、医药卫生行业的医药、食品、保健品等的分析,并且用于皮革鞣革机理的研究中。氨基酸分析,按分离方法分可分为纸色谱法、离子交换色谱法、反相高效液相色谱法、毛细管电泳法、薄层色谱法、气相色谱法等;按检测方法分 可分为分析法、电方法(包括电导检测、安 培检测)、分光光度法(包括可见光分光光度法,紫外光分光光度法和荧光分光光度法)等;按衍生反应的先后,可分为柱前衍生和柱后衍生法。由于氨基酸是一类性质相似的生物活性物质,在分析过程中,检测方法的灵敏度对分析的准确性起非常重要的作用。本文对氨基酸分析的检测方法进行综述,以期提高氨基酸分析的灵敏度、准确度,为快速、高效的氨基酸分析及其方法的建立提供参考。
分析法
1.1 甲醛滴定法 甲醛滴定法用于氨基氮的测定,可以测出样品中总氨基酸的含量,其原理是在中性或弱碱性水溶液中,氨基酸的α—氨基与醛类反应生成Schiff碱:α—氨基酸与甲醛反应生成亚甲基亚氨基衍生物亚甲基甲氨基衍生物用碱滴定,从而得到样品中 总氨基酸的含量。甲醛法准确度差,终点较难掌握。
1.2 凯氏定氮法 凯氏定氮法是用于测定样品中总氮的含量,然后根据蛋白质和氨基酸中的氮含量,从而得知含氮的氨基酸、蛋白质的总量。该方法准确度高,但操作步骤复杂,试剂耗量多,测定周期长。
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