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氨基酸的分析方法
发布时间:2014-11-27
氨基酸是重要的生命物质,是组成生物体中酶和蛋白质的基本单元。可参与蛋白质合成的氨基酸(亦称为基本氨基酸)有20多种,主要以下列两种形式存在于自然界中,一种是以游离态存在于生理体液(如:血浆、尿液等)、食品(如:肉制品、饮料)中,另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。氨基酸分析是蛋白质组学、生物、食品科学、临床医学、化工轻工、考古研究、地质推断、宇宙探秘等领域的重要研究手段,因此对氨基酸分析方法的研究与改进具有重要意义。
氨基酸的分析方法常规的分析手段均可用于氨基酸分析,目前常用氨基酸分析方法有分析法、光谱分析法、电分析法、毛细管电泳法和色谱分析法等。
分析法分析法是一类比较传统的氨基酸分析方法,主要包括甲醛滴定法和定氮法。甲醛滴定法甲醛滴定法的原理是向中性或碱性氨基酸溶液中加入甲醛,氨基酸的氨基和甲醛可形成羟甲基衍生物,使用碱标准溶液滴定该衍生物,采用酚酞指示剂确定滴定终点。这种方法简单易行、费用低廉,但由于在实际操作中难以准确掌握滴定终点,该方法准确度较差。
定氮法通过测定样品中氮元素的总量,并根据特定样品的蛋白质和氨基酸的氮含量平均值计算样品中蛋白质与氨基酸的含量。此方法由于1833年首先提出,经过长期改进,目前己演变出常量法、微量法、半微量法、自动定氮法及改良法等多种。该方法的测量结果准确度较高,但由于操作步骤复杂、测定周期长、无法识别氮元素来源等不利因素影响,其应用范围受到了较大限制。
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