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谷氨酸氧化酶电极的流动注射分析系统的工作特性
发布时间:2014-12-16
谷氨酸的测定在味精生产、食品工业及临床检验中都十分重.要。味精生产厂家均采用传统的瓦勃呼吸计分析谷氨酸单钠。该法手续繁、耗时长,且数据准确性差。随着味精生产的发展和实现在线检测与控制的要求,采用酶(或微生物)电极分析谷氨酸早已引起广泛注意。国外先后研究了采用谷氨酸合成酶、谷氨酸脱狡酶和谷氨酸脱氢酶的酶电极,但其性能离实用尚有距离。八十年代初Hikuma,M.等成功地研制出采用含有谷氨酸脱狡酶活性的大肠杆菌的微生物传感器,并应用于生产。但该电极为电位测量型,响应及返洗时间较长,用于测定味精发酵液时,须先除去二氧化碳,使其推广应用受到限制。近年来德国的Woflenberg等研制出基于谷氨酸氧化酶的酶电极,其响应时间短,选择性好,具有明显的优点,但其线性范围窄,仅达到o.smmul/L。
日本的Karube应用集成电路技术制成了微型氧电极,并以此为基础电极研制出谷氨酸氧化酶电极,线性范围5一50mmol/L,但响应时间长达smin。研究工作多采用脱狡酶电极和微生物电极,响应时间较长,谷氨酸氧化酶电极尚未见文献报道。
本文研制了一种适用于味精生产过程中谷氨酸分析的扩散控制型谷氨酸氧化酶电极,并构建了采用该电极的流动注射分析(FIA)系统,成功地用于谷氨酸分析。
流动注射分析技术已广泛用于仪器分析,为了给电极的仪器化提供实验依据,构建了采用谷氨酸氧化酶电极的流动注射分析系统。根据载液流速、进样量等对系统响应电流影响的实验结果,选定载液流速为2.4ml/min,进样量为25时。该系统的工作特性如下:
响应特性和线性范围:系统进样105出现响应电流,205电流达到极大值。检测速度不小于60次/h。系统的响应电流和L一谷氨酸浓度的关系的校正曲线。该系统线性检测区间5一8000mg/L,线性相关系数0.9998,检测下限smg/L。在具体应用中,可以根据不同要求,调整载液流速和进样址,进一步扩展系统的线性范围,但检测灵敏度也随之改变。
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